淺談NF—kB信號在類風濕關節炎中的作用及臨床意義
臨床經驗
作者：陳玉婷 曹永芬
【摘要】目的：分析NF-kB信號在類風濕關節炎臨床治療指導評價中應用的意義。方法：選取60隻雄性SD大鼠，0.1ml福氏完全佐劑注入右後足足墊皮內，隨機平均分為對照組與治療1組、治療2組，空白組不予治療，治療1組艾灸治療，治療2組艾灸治療同時摘除腎上腺，對比3組NF-kB p65的活性。結果：對照組、治療1組、治療2組最終NF-kBp6 5吸光度值分別為0.64±0.02、0.37±0.04、0.63±0.01，治療1組NF-kB p65吸光度值明顯優於對照組（P
0.05）。結論：艾灸療法可有效抑製NF-kB炎性信號通路、抗炎，但需要在HPAA完整性前提下才能實現。 【關鍵詞】NF-kB信號；類風濕關節炎；臨床應用 類風濕性關節炎（RA）是集骨纖維化、骨質破壞、軟骨吸收、慢性炎性反應於一體的慢性自身免疫性疾病，RA的產生主要因為體內缺乏內源性糖皮質激素。HPAA（下丘腦一垂體一腎上腺軸）在治療中發揮著調節免疫、抑製RA炎性反應的重要作用。而艾灸被證實是RA臨床的有效治療方案，本研究分析了艾灸治療中NF-kB信號特點。 1 資料與方法 1.1 一般資料 選取60隻健康的雄性SD大鼠，隨機平均分為對照組和2個治療組。對照組20隻，體重（202.1±13.1）g；治療1組20隻，體重（199.5±10.4）g；治療2組20隻，體重（205.3±13.4）g。3組健康狀況和基礎資料無統計學差異，P>0.05。 1.2 方法 首先將0.1ml福氏完全佐劑注入右後足足墊皮內，對照組不予以治療。 治療2組摘除腎上腺：腹腔注射50mg/kg戊巴比妥鈉。按麻醉，俯臥，在兩側背部肋緣下1cm×1cm範圍去毛，清潔消毒，將肌肉分離後找準雙側腎上腺，切除並縫合。 2個治療組均予艾灸治療。將大鼠固定於台上後在足三裏、腎俞等部位各麥粒灸5壯（每壯為艾絨5g），左右交替艾灸，1次/d，1療程為6天，連續治療3療程。 1.3 評價標準 對比3組NF-kB p65的活性：先後以標本固定液、石蠟包埋處理3組右側踝關節，製作滑膜組織切片並脫蠟、衝洗、PBS浸泡，去離子水孵育，山羊血清工作液滴加處理，孵育，辣根酶標記、DAB顯色劑處理，蒸餾水衝洗、複染、水洗、脫水，透明處利後封片。以普通光鏡放大200倍觀察，NF-kB p65陽性表達即可見呈褐色，陽性越明顯、染色越深。視野由計算機攝像係統采樣、BioMias對圖像中信號特點處理分析，計算陽性染色麵積、吸光度數據。 1.4 數據處理 本次數據采用SPSS 16.0軟件對本研究的數據進行統計學的分析，計數資料的對比應用卡方檢驗，而計量資料的對比應用t檢驗，P 2 結果 對照組、治療1組、治療2組最終NF-kB p65吸光度值分別為0.64±0.02、0.37±0.04、0.63±0.01，治療1組NF-kBp65吸光度值明顯優於對照組（P0.05）。 3 討論 RA臨床治療多使用非甾體消炎藥、免疫抑製類藥物，內源性GC的腎上腺皮質經典激素類療法也有理想的抗炎效果。 NF-kB是RA進展中滑膜炎性反應重要的炎性細胞信號轉導通道，其可通過IKK的激活，激活IKB磷酸化修飾，促使p65與p50的大量產生，尤其可提升細胞核中上述物質的含量，從而對炎性反應的發生起到調控作用。NF-kB類蛋白在滑膜細胞核內大量存在，若發生類風濕關節炎，患者患處滑膜內就會有更多的NF-kB表達現象。本次研究關節炎大鼠模型相關操作中，福氏佐劑造模後會很快發生NF-kB表達現象。GC的存在會對NF-kB細胞信號的轉錄過程產生幹擾和抑製，從而達到理想的抗炎效果。而HPAA的保留是實現GC合理分泌、控製NF-kB轉錄工作的關鍵。 本研究分析了艾灸治療中NF-kB信號特點在足三裏、腎俞等部位各麥粒灸5壯（每壯為艾絨5g），連續治療3療程共18d，最終檢測到對照組、治療1組、治療2組最終NF-kB p65吸光度值分別為0.64±0.02、0.37±0.04、0.63±0.01，保留HPAA且規範艾灸的一組有很好的NF-kBp65吸光度結果，證實了治療的有效性。艾灸可改善HPAA功能，更好地對炎性細胞因子釋放產生調控，達到治療目的。艾灸的治療效果必須在HPAA保留的前提下才能得到保證，再次證明了HPAA功能正常情況下配合艾灸治療的必要性。