特許狀的內容確定了英國殖民政策的基本方針，指明了英屬北美殖民地的基本性質和發展方向。雖然其內容後來根據情況的變化有所修正、補充和改變，但是基本政策一直保持不變。後來，特許狀的基本內容成為美利堅文明的曆史起點。
拿到特許狀後，弗吉尼亞公司很快就組織起殖民隊伍向新大陸進發。
這支殖民隊伍大概有120人，其中有很多窮人。他們支付不起前往新大陸的交通費用，就與公司簽約，以義務為公司效力7年為代價，換取了免費前往弗吉尼亞的機會。1606年12月，弗吉尼亞公司的殖民隊伍乘坐三艘船駛向目的地，但是旅途並不順利，很多人因病命喪途中，隻有100多人最終抵達新大陸的一個河口。那是1607年5月24日，為感謝國王詹姆士一世，抵達者將他們登陸的河口命名為詹姆斯鎮。
新大陸並不是想象中的天堂，剛到的移民很快就發現要在這裏立足是一件十分艱難的事。登陸時已經錯過了播種季節，移民中有相當一部分已過慣養尊處優生活的“紳士”們根本進行不了體力勞動，於是不斷發生爭奪糧食的激烈衝突，因疾病和饑餓而死亡的移民漸漸超過一半，幸存下來的很多移民因為懼怕艱苦的生活選擇打道回府。十年裏，盡管不斷有新移民加入，但是弗吉尼亞的人口也不過1000人。幸虧當時負責殖民點軍事防禦的約翰·史密斯上尉管理有方，他首先與當地的印第安人搞好關係，從他們那裏獲得一些玉米和山藥，解決了饑荒這一燃眉之急；然後，他在殖民點實行軍事管製，不勞動者不得食。經過史密斯上尉的努力，詹姆斯鎮的移民很快擺脫了困境，生活安定下來。但是，他們與印第安人的關係時好時壞。為了恫嚇印第安人，阿蓋爾上尉率眾綁架了印第安人部落首領的女兒波卡洪塔斯。幸運的是，波卡洪塔斯很快喜歡上這些英國人，並學會他們的語言，還在1614年嫁給移民約翰·羅爾夫。這樁婚姻使英國移民與印第安人和睦相處達十年之久。
和平的歲月裏，詹姆斯頓的移民很快向印第安人學會了種植煙草，並逐漸發展起煙草貿易。
當時的歐洲吸煙風氣盛行。1614年，約翰·羅爾夫向英國銷售了第一批煙草，大受當地民眾的歡迎。此後，煙草貿易的利潤吸引了更多的移民前來定居。借此時機，弗吉尼亞公司改革了土地製度，規定凡是1616年之前自費前來的移民每人授予100英畝的土地，永久免稅；1616年之前由公司出資運來的移民在為公司勞動滿7年後也授予100英畝土地；1616年以後到來的移民也能獲得50英畝的土地。
這次土地製度的改革立即吸引了大批移民。1619年至1625年期間，有近5000名英國移民來到詹姆斯頓，殖民點迅速擴大，並最終形成後來的弗吉尼亞殖民地。但好景不長，1625年，弗吉尼亞公司因經營不善和人事糾紛而陷入困境，瀕於破產，於是英國國王查理一世宣布將殖民地收歸國有，由英國政府直接管理。
普利茅斯公司的殖民活動比弗吉尼亞公司稍晚。1607年，他們派了兩艘船載著120人向新大陸進發。這些人在緬因州的薩加達霍克河上岸，登陸後建起一座簡陋的村落。普利茅斯公司的殖民活動並不順利，移民內部的不團結、內訌使得這裏再也沒有新的移民到來。這使已經到達的移民逐漸喪失信心，紛紛返回家園。到1609年，所有移民全部返回英國，普利茅斯公司在北美的殖民活動宣告失敗。
弗吉尼亞殖民地的建立使英國在新大陸的殖民有了成功的開端。北美獨立戰爭後，1788年，弗吉尼亞殖民地成為美國第十個州，首府在裏士滿。
英國在新大陸的殖民地發展得並不迅速，直到詹姆斯頓殖民地建立13年後，由於追求宗教自由的原因，英國在新大陸的殖民地才不斷發展、擴大。
在這一過程中，普裏茅斯殖民地成為繼詹姆斯頓殖民地後的第二個英國殖民點。