超濃縮複合己酸菌液:己酸菌數(厭氣芽孢杆菌數)≥3.5×108個/mL;酸度(以己酸計):≥0.4g/100mL,武漢佳成生物製品有限公司生產。

營養液:天然植物蛋白液、醅漿、生香活性幹酵母液、酵母抽提物、無機鹽溶液、尾酒。

酯化液:多糖營養液、雙輪底醅漿、無機鹽溶液、中流曲酒。

紅曲酯化酶:水分(%):7.1;酯化力[mg/(g·100h)]:40.7。武漢佳成生物製品有限公司生產。

2.2測定方法

水分:烘幹法。

pH:pH計顯示法。

有效氮:擴散法。

有效磷:NH4F-HCl法。

有效鉀:四苯硼鈉比濁法。

腐殖質:重鉻酸鉀氧化法。

兼氣杆菌(含己酸菌):血球計數板法。

放線菌:平板分離計數法。

硫化物:亞甲基藍分光光度法。

試驗酒:按GB/T 10345—2007白酒分析方法標準執行。

3試驗所需材料製備

3.1生態窖泥培養所需塘泥的選擇

塘泥是窖泥培養中有益微生物繁殖所需基本的來源和棲息地,在選擇考察時要求水塘周圍無化工企業和畜牧養殖場,並有長年沉積的原生態塘泥[1],取樣進行理化和微生物分析如下。

從分析結果表明:公司藕塘泥各項營養成分含量和有益菌高於合興1組、2組、3組、4組、5組,並且硫化物、致病菌和大腸杆菌都低於其他區域的采集樣。因此,生態窖泥試驗中所用塘泥為公司藕塘泥。

藕塘泥:其底部汙泥因年久日深,蓮藕及其莖稈葉沉降大量腐殖質,魚類以蓮藕莖稈葉為食,消化分解排泄物,沉降大量腐殖質,其中生存大量厭氧細菌,並含有相當數量的己酸菌。營養豐富,含N 0.4%~0.5%,含P2O5 0.3%~0.5%,含K2O 0.7%~0.8%。然後風幹、粉碎使用。

3.2生態窖泥培養所需黃黏土的選擇

黃黏土是有益微生物的棲息基地,起增加界麵、吸著營養與調節pH的作用。試驗選用無砂、黏性強、硫化物含量低、有害微生物少,pH為5.5~6.0的黃黏土。

從分析結果表明:藕池鎮1組黃黏土pH為5.7,呈微酸性,且硫化物、大腸杆菌均低於其他兩地的黃黏土,並不含致病菌,因此選用安鄉河床的黃黏土。

從黃黏土、塘泥比較測定結果表明:黃黏土選擇安鄉河的河床原生態黃土。黃黏土由黏性膠體所構成,其骨架是由腐殖酸鹽結構疊合而成的微粒子,微粒子表麵和邊緣有電荷可以相互組成凝聚體,除支撐作用外,粒子表麵及側麵起吸附菌體、濃縮營養、增強緩衝作用,其空隙又是微生物的安樂窩,用以貯存營養成分和代謝產物,並能貯存大量的水分和營養物質、原生質、酸、醇、酯、醛、酮的有效成分。

塘泥選擇公司塘泥,公司3個魚塘共30畝(1畝=666.67m2)水麵,水下長蓮藕、水中養魚,水上收蓮子,蓮藕不挖,莖由微生物分解腐爛,供培養塘泥中微生物營養成分和腐殖質,老窖泥、老窖皮泥、老窖底泥都是從15個23年的老窖池中取樣檢測結果。

3.3生態窖泥培養所需酯化液製備

取多糖營養液30kg、雙輪底醅漿20kg、無機鹽溶液12kg、60%~62%(vol)的中流曲酒6.7kg在混合攪拌中用氨水和氫氧化鈉調pH為6.0~6.5製成的培養液中放入生香活性幹酵母活化菌液12kg和窖底老窖泥14kg、麥曲粉16kg,進行接種,攪勻後在28~37℃富集擴大培養、酯化15d。

3.4生態窖泥培養所需營養液製備

天然植物蛋白液的製備:取6~8°Bé的天然植物蛋白液100℃加熱2min後冷卻至35℃備用。

醅漿的製備:取剛出甑的糟醅與水按照1∶4比例混合,攪拌100℃加熱20min過濾,溫度降至35℃以下的濾上液,加入發酵120d的香醅5%備用。

生香酵母液活化液的製備:在4%的糖液中加入生香活性幹酵母粉混合,攪勻後活化1h備用。

酵母抽提物的製備:在新鮮黃水中添加1%酵母浸膏混合攪勻備用。

無機鹽溶液的製備:將由1kg水溶解0.2kg磷酸氫二鉀的溶液、由1kg水溶解0.1kg硫酸鎂的溶液、由1kg水溶解0.2kg乙酸鈉的溶液進行混合,製備成無機鹽溶液備用。

在上述成分混合攪拌過程中用氨水和氫氧化鈉調節pH為6.5,製備成窖泥營養液。

3.5生態窖泥培養所需複合己酸菌富集液製備

取優質老窖泥1kg添加適量水後80℃熱處理10min,放入到95kg醅漿水和營養液5kg中調pH為6.5,接入超濃縮複合己酸菌5kg,密封後在35℃培養7d。

4試驗

4.1原生態試驗窖泥配方的組成

采用不同配比上述已確認的材料,攪拌混合均勻,用塑料薄膜四周封閉,在厭氧條件下30~35℃保溫培養30~35d後,進行理化和微生物分析試驗,確認生態試驗窖泥配方的組成。

分析結果表明:生態試驗窖泥3號的各項營養成分豐富、均衡、兼氣杆菌多,因此,選用生態試驗窖泥3號配方。

4.2生態試驗窖泥培養

4.2.1工藝流程

工藝流程。

4.2.2配料和浸潤

將黃黏土、老窖泥、泥炭、大曲粉、豆餅粉、雙輪底香醅、蠶蛹粉、熱酒糟、紅曲酯化酶按比例分層鋪勻,在其麵上均勻潑灑定量的黃水、20~22度的尾酒、營養液,翻拌均勻,用黃土覆蓋其上,浸潤24h左右。

4.2.3翻拌和泥

將經過浸潤的物料翻拌,均勻潑灑酯化液,然後接種複合己酸菌富集液,用攪拌機攪拌混合均勻。

4.2.4入窖和檢測