蛋白腖中應含有豐富的色氨酸。每批蛋白腖買來後，應先用已知菌種鑒定後方可使用。
14.尿素瓊脂
（1）成分蛋白腖1g，氯化鈉5g，葡萄糖1g，磷酸二氫鉀2g，0.4%酚紅溶液3mL，瓊脂20g，蒸餾水1000mL，20%尿素溶液100mL，pH7.2±0.1。
（2）製法將除尿素和瓊脂以外的成分配好，並校正pH，加入瓊脂，加熱溶化並分裝燒瓶。121℃高壓滅菌15min。冷至50～55℃，加入經除菌過濾的尿素溶液。尿素的最終濃度為2%，最終pH應為7.2±0.1。分裝於滅菌試管內，放成斜麵備用。
（3）試驗方法挑取瓊脂培養物接種，在（36±1）℃培養24d，觀察結果。尿素酶陽性者由於產堿而使培養基變為紅色。
15.氰化鉀（KCN）培養基
（1）成分蛋白腖10g，氯化鈉5g，磷酸二氫鉀0.225g，磷酸氫二鈉5.64g，蒸餾水1000mL，0.5%氰化鉀溶液20mL，pH7.6。
（2）製法將除氰化鉀以外的成分配好後分裝燒瓶，121℃高壓滅菌15min。放在冰箱內使其充分冷卻。每100mL培養基加入0.5%氰化鉀溶液2mL（最後濃度為1∶10000），分裝於12mm×100mm滅菌試管，每管約4mL，立刻用滅菌橡皮塞塞緊，放在4℃冰箱內，至少可保存兩個月。同時，將不加氰化鉀的培養基作為對照培養基，分裝試管備用。
（3）試驗方法將瓊脂培養物接種於蛋白腖水內成為稀釋菌液，挑取1環接種於氰化鉀（KCN）培養基。並另挑取1環接種於對照培養基。在（36±1）℃培養1～2d，觀察結果。如細菌生長即為陽性（不抑製），經2d細菌不生長為陰性（抑製）。
注：氰化鉀是劇毒藥物，使用時應小心，切勿沾染，以免中毒，夏天分裝培養基應在冰箱內進行。試驗失敗的主要原因是封口不嚴，氰化鉀逐漸分解，產生氫氰酸氣體逸出，以致藥物濃度降低，細菌生長，因而造成假陽性反應。
16.氧化酶試驗
（1）試劑
①1%鹽酸二甲基對苯二胺溶液：少量新鮮配製，於冰箱內避光保存。
②1%α-萘酚-乙醇溶液。
（2）試驗方法取白色潔淨濾紙沾取菌落。加鹽酸二甲基對苯二胺溶液一滴，陽性者呈現粉紅色，並逐漸加深；再加α-萘酚溶液一滴，陽性者於30s內呈現鮮藍色。陰性於2min內不變色。或以毛細胞吸管吸取試劑，直接滴加於菌落上，其顯色反應與以上相同。
17.過氧化氫酶試驗（觸酶試驗）
（1）試劑3%過氧化氫溶液，臨用時配製。
（2）試驗方法挑取固體培養基上菌落一接種環，置於潔淨試管內，滴加3%過氧化氫溶液2mL，觀察結果。
（3）結果於半分鍾內發生氣泡者為陽性，不發生氣泡者為陰性。
18.三糖鐵瓊脂（TSI）
（1）成分蛋白腖20g，牛肉膏5g，乳糖10g，蔗糖10g，葡萄糖1g，氯化鈉5g，硫酸亞鐵銨［Fe（NH4）（SO4）2·6H2O］0.2g，硫代硫酸鈉0.2g，瓊脂12g，酚紅0.025g，蒸餾水1000mL，pH7.4。
（2）製法將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解於蒸餾水中，校正pH，加入瓊脂，加熱煮沸，以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5mL，搖勻。分裝試管，裝量宜多些，以便得到較高的底層。121℃高壓滅菌15min，放置高層斜麵備用。
19.半固體瓊脂
（1）成分蛋白腖1g，牛肉膏0.3g，氯化鈉0.5g，瓊脂0.35～0.4g，蒸餾水100mL，pH7.4。
（2）製法煮沸溶解各成分，校正pH後分裝小試管，121℃高壓滅菌15min。直立凝固。
20.葡萄糖半固體發酵管
（1）成分蛋白腖1g，牛肉膏0.3g，氯化鈉0.5g，1.6%溴甲酚紫酒精溶液0.1mL，葡萄糖1g，瓊脂0.3g，蒸餾水1000mL，pH7.4。
（2）製法將蛋白腖、牛肉膏和氯化鈉加入於中，校正pH後加入瓊脂加熱溶解，再加入指示劑和葡萄糖，分裝小試管，121℃高壓滅菌15min。
21.5%乳糖發酵管
（1）成分蛋白腖0.2g，氯化鈉0.5g，乳糖5g，2%溴麝香草酚藍水溶液1.2mL，蒸餾水1000mL，pH7.4。
（2）製法除乳糖以外的各成分溶解於50mL蒸餾水內，校正pH。將乳糖溶解於另外50mL蒸餾水內，分別於121℃高壓滅菌15min，將兩液混合，以無菌操作分裝於滅菌小試管內。
注：在此培養內，大部分乳糖遲緩發酵的細菌可於1d內發酵。