【考點2】皂苷的水解
皂苷苷鍵的裂解，可采用酸催化水解、氧化開裂、酶解等。水解條件劇烈時，一些皂苷元往往會發生脫水、環合、雙鍵移位、取代基移位、構型轉化等，生成次生產物。需選用溫和的水解方法，如光分解法、Smith氧化降解法、酶解法或土壤微生物淘汰培養法等。
【考點3】皂苷的顯色反應
1. Liebermann反應樣品溶於乙酐，加濃硫酸，皂苷類成分表現出一係列的顏色變化。
2.醋酐-濃硫酸（Liebermann Burchard）反應可用以區別甾體皂苷和三萜皂苷，甾體皂苷最後呈藍綠色，三萜皂苷最後呈紅色或紫色。
3.氯仿-濃硫酸反應樣品溶於氯仿，加入濃硫酸後，則氯仿層呈現紅色或藍色，硫酸層呈現綠色熒光。
4.三氯醋酸反應將甾體皂苷樣品的氯仿溶液滴在濾紙上，加三氯醋酸試劑，加熱至60℃，生成紅色漸變為紫色。在同樣條件下，三萜皂苷必須加熱到100℃才能顯色。
5.五氯化銻反應樣品溶於氯仿或乙醇，點於濾紙上，噴以五氯化銻氯仿液，60~70℃加熱，顯藍色、灰藍色或灰紫色。
6.芳香醛-硫酸/高氯酸反應芳香醛多用香草醛和對-二甲氨基苯甲醛。其中以香草醛應用最為普遍，且顯色靈敏。
第三節皂苷的提取分離與結構鑒定
一、皂苷的提取分離
【考點1】皂苷及其苷元的常用提取方法
1.皂苷的提取
（1）甲醇或乙醇提取-正丁醇萃取法：一般常用不同濃度的乙醇或甲醇作溶劑提取皂苷。醇提取物混懸於水中，先用石油醚、乙醚等親脂性有機溶劑萃取，除去親脂性雜質，然後再用水飽和的正丁醇萃取，得到總皂苷。此法被認為是皂苷提取的通法。
（2）甲醇或乙醇提取-丙酮或乙醚沉澱法：醇提取液適當濃縮後，加入適量的丙酮或乙醚，則皂苷可能被沉澱析出。
（3）堿水提取法：一些酸性皂苷，可依其難溶於水，易溶於堿水的性質，先用堿水提取，再加酸酸化使皂苷沉澱析出。
2.皂苷元的提取皂苷元多數難溶或不溶於水，易溶於有機溶劑，所以一般采用加酸加熱將粗皂苷水解，再用與水不相混溶的弱極性有機溶劑，如苯、氯仿等從水解液中將皂苷元提取出來，或者直接用酸水加熱水解中藥原料中的皂苷，濾除不溶物，水洗，幹燥，再用有機溶劑提取皂苷元。
皂苷加酸加熱水解提取皂苷元時，應注意在劇烈的酸水解條件下，皂苷元容易發生脫水、環合、雙鍵移位、取代基移位、構型轉化等變化，使得到的皂苷元不是原來的結構形式，而是次生物質。
【考點2】皂苷的色譜分離
1.吸附色譜法常用的吸附劑是矽膠、氧化鋁和反相矽膠，洗脫劑一般采用混合溶劑。
2.分配色譜法一般用低活性的氧化鋁或矽膠作支持劑，用不同比例的氯仿-甲醇-水或其他極性較大的有機溶劑進行梯度洗脫。
3.高效液相色譜法一般使用反相色譜法，以乙腈-水或甲醇-水為流動相。
【考點3】甾體皂苷元的分離
分離含有羰基的甾體皂苷元，常用季銨鹽型氨基乙酰肼類試劑，如吉拉爾T（Girard T）或吉拉爾P（Girard P）兩種試劑。這類試劑在一定條件下與含羰基的甾體皂苷元生成腙，借此與不含羰基的皂苷元分離。
二、皂苷的結構鑒定
【考點1】MS、13C－NMR譜在三萜皂苷結構鑒定中的應用
1. MS對於具有Δ12的三萜皂苷，分子中因具有環乙烯結構，容易發生RDA裂解，根據生成的碎片離子峰可以確定A、B環及D、E環上的取代基性質、數目、位置等。
2. NMR譜五環三萜齊墩果烷型（β-香樹脂醇型）含有6個季碳原子，13CNMR譜中有6個季碳信號，烏索烷型（α-香樹脂醇型）13CNMR譜中有5個季碳信號。羽扇豆烷型13CNMR譜中有異丙基信號。
【考點2】甾體皂苷元的IR光譜特征
紅外光譜區別C-25的立體異構體。25D係甾體皂苷有866～863cm-1、899～894cm-1、920～915cm-1及982cm-1四條譜帶，其中 899～894cm-1處的吸收較920～915cm-1處的強2倍，25L係甾體皂苷在857～852cm-1、899～894cm-1、920～915cm-1及986cm-1處也有吸收，其中920～915cm-1處的吸收較899～894cm-1處強3～4倍。
另外，也應了解下麵的知識。
質譜甾體皂苷元的質譜中均出現一個很強的m/z139的基峰和中等強度的m/z115碎片峰以及一個很弱的m/z126的輔助離子峰。