HPLC測定榮心丸中的5種化學成分
製劑與炮製
作者：儲忠英 吳麗紅 田蘭
[摘要]該文通過HPLC建立了同時測定榮心丸（五味子、丹參）中五味子醇甲，丹參酮Ⅰ，隱丹參酮、丹參酮ⅡA，五味子乙素5種有效成分的方法。Agilent C18色譜柱，以甲醇-水為流動相，線性梯度洗脫，體積流量1.0 mL·min-1；柱溫30 ℃；檢測波長240 nm。五味子醇甲，丹參酮Ⅰ，隱丹參酮，丹參酮ⅡA，五味子乙素分別在3.000～48.00（r=1.000），3.985～63.76（r=0.999 9），6.370～101.9（r=1.000），8.690～139.0（r=0.999 9），1.700～27.20 mg·L-1（r=0.999 9）呈良好的線性關係，平均回收率分別為98.44%，100.3%，99.29%，99.07%，98.42%，RSD分別為0.60%，1.1%，0.52%，0.72%，0.97%。實驗表明本方法簡便、準確、重複性好，可同時測定榮心丸中5種化學成分。
[關鍵詞]榮心丸；五味子醇甲；丹參酮Ⅰ；隱丹參酮；丹參酮ⅡA；五味子乙素；HPLC
榮心丸由玉竹、炙甘草、五味子、丹參、降香、山楂、廖大青葉、苦參組成，具有益氣養陰、活血解毒的功效，用於氣陰兩虛或氣陰兩虛兼心脈淤阻所致的胸悶、心悸氣短等症狀，也用於病毒性心肌炎的治療，收載於國家食品藥品監督管理總局國家藥品標準第65冊[1]。該標準僅用HPLC對丹參酮ⅡA進行了質量控製，且樣品處理方法也較繁瑣。本試驗參考相關方法[2-7]，選擇五味子和丹參中五味子醇甲、五味子乙素、丹參酮Ⅰ、隱丹參酮、丹參酮ⅡA 5種有效成分，采用梯度洗脫，實現在同一係統中同一波長下同時檢測，並對原標準中樣品前處理的方法進行優化，縮短前處理時間，且結果更穩定。試驗證明本方法簡便、準確、重複性好，可用於榮心丸的質量控製。
1 材料
Agilent 1100 高效液相色譜儀，DAD檢測器，Satious AG125 電子天平。
五味子醇甲（批號 110857-200709）、五味子乙素（批號110765-201205）、丹參酮I（批號0867-200205）、隱丹參酮（批號110852-200806）、丹參酮ⅡA （批號110766-200609）均由中國食品藥品檢定研究院提供；甲醇為色譜純；榮心丸（上海玉丹藥業有限公司，國藥準字Z10970095，批號110802，120302，130201，130601，120602）。
2 方法與結果
2.1 色譜條件 Agilent C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，2.7 μm）；流動相甲醇（A）-水（B），線性梯度洗脫，0～8 min，49%A；8～10 min，49%～62% A；10～32 min，62% A。體積流量1.0 mL·min-1；檢測波長240 nm；柱溫30 ℃；進樣量5 μL。
2.2 溶液的製備 對照品溶液的製備：精密稱取五味子醇甲、隱丹參酮、丹參酮ⅡA對照品適量，加甲醇溶解製成每1 mL中含五味子醇甲300.0 μg、隱丹參酮637.0 μg、丹參酮ⅡA 869.0 μg的混合溶液，作為對照品溶液①；取丹參酮Ⅰ、五味子乙素對照品，加甲醇製成每1 mL中含丹參酮Ⅰ 79.70 μg、五味子乙素34.0 μg的混合溶液，作為對照品溶液②。
供試品溶液的製備：取本品適量，剪碎，混合均勻，精密稱取4 g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定質量，超聲10 min使分散，浸漬30 min，繼續超聲30 min，放冷，稱定質量，用甲醇補足減失的質量，搖勻，靜止，取上清液用0.45 μm微孔濾膜過濾，即得。
陰性對照溶液的製備：按廠方提供的處方中藥味的比例及工藝，再按供試品溶液的製備方法製成不含五味子和丹參的陰性對照溶液。
2.3 專屬性試驗 吸取對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液各5 μL，按上述色譜條件分別進樣，結果供試品溶液中在五味子醇甲、丹參酮Ⅰ、隱丹參酮、丹參酮ⅡA、五味子乙素對照品色譜相同的保留時間處均有相應的色譜峰，各峰與相鄰峰之間的分離度均大於2.0，理論板數均大於6 000，陰性對照溶液顯示在各對照品主峰保留位置均無相應的幹擾峰。說明供試品中其他成分對檢測結果均無影響。