丹參水提液對蘿卜種子種苗化感效應譜效關係研究
資源與鑒定
作者：牛敏等
[摘要] 為了確定丹參水浸液指紋圖譜所代表的特征峰與其對蘿卜種子種苗化感效應的的相關性，該文采用灰關聯度分析構建了丹參水浸液對蘿卜種子種苗化感效應與水浸液指紋圖譜的“譜效關係”。分析發現丹參水浸液15個共有峰對蘿卜種子種苗化感作用貢獻率較高。這一研究模式為中藥化感成分篩選研究提供了新的思路。
[關鍵詞] 丹參；水提液；指紋圖譜；化感效應；譜效相關
[Abstract] To explore the effective components represented by fingerprint contributed to allelopathic effect of different Salvia miltiorrhiza aqueous concentration on seeds and seedlings of radish， grey relational analysis was used to establish the chromatography-efficacy relation. The results show that 15 peaks devote high allelopathic contribution to radish seeds and seedlings. The study will provide a new concept for allelochemicals screening and study.
[Key words] Salvia miltiorrhiza； aqueous extracts； HPLC； allelopathic； chromatography-efficacy relation
連作障礙（consecutive monoculture problem）是指在正常管理措施下，同一塊地連續多年種植相同作物造成作物產量降低、品質變劣、生育狀況變差、病蟲害頻發的現象[1]。丹參為唇形科植物丹參Salvia miltiorrhiza Bge.的幹燥根和根莖，藥用曆史悠久，具有祛瘀止痛、活血通經、清心除煩等功效[2]，屬於常用大宗中藥材之一。近年來，由於丹參藥材市場需求量的逐年大幅度增加，目前主要依靠人工栽培來滿足需要，山東、河南、陝西、四川等是其主要產區。在種植過程中，丹參連作現象比較嚴重。同一地塊連續種植2年以上時，藥材的產量與質量均有明顯下降，生產中主要通過合理輪作來解決此問題，輪作作物主要有小麥、玉米、蘿卜、菘藍、黃芩等。研究發現[3-4]，丹參水提液對菘藍和黃芩種子具有明顯化感作用，但對蘿卜種子有無化感作用及其發揮化感作用的物質基礎尚未見報道。本研究以蘿卜種子為受試體，初步探討了丹參水浸液對其萌發和幼苗生長的化感效應，同時建立了丹參水浸液HPLC圖譜，並采用灰關聯度分析對化感效應與HPLC圖譜間的譜效關係進行了研究，旨在為明確丹參化感物質及建立安全、有效、高產種植模式提供依據。
1 材料
丹參S.miltiorrhiza根及根莖於2013年10月采集於山東中醫藥大學藥用植物園；蘿卜Raphanus sativus L.種子購自長清黃河商場；迷迭香酸（20120809）、丹酚酸B（PA0418RA13）購自上海源葉生物科技有限公司。
AgiLent1260高效液相色譜儀（G1315B二極管陣列檢測器），ZORBAXSB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色譜柱，LRH-400-GⅡ型微電腦培養箱（上海博訊實業有限公司醫療設備廠）等。
乙腈、甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。
2 方法與結果
2.1 化感效應生物活性測定
2.1.1 發芽試驗 參照文獻[3]采用培養皿濾紙法進行發芽試驗，9 d後統計發芽率、發芽勢和發芽指數。種苗生長試驗參照文獻[3]采用砂培法進行，7 d後結束試驗，每個處理隨機選取50個幼苗，測定根長、苗地上部分、鮮重和幹重，然後進行統計。
2.1.2 化感效應指標計算 [4] 化感效應數據參照Williamson GB方法進行計算，即 RI=（Ti-Ta）/Ta×100%，其中Ti為測試項目的處理值，Ta為對照值。RI≥0表示具有促進作用，RI
2.1.3 化感效應活性統計 將化感效應指標數據采用SPSS 17.0統計軟件進行顯著性檢驗及方差分析，結果顯示不同處理濃度組間化感效應指標之間差異均有顯著性（P
結果顯示，丹參水浸液對蘿卜種子、種苗均具有明顯抑製作用，隨著濃度增大，抑製作用呈現增大趨勢。