2.1.4 化感效應主成分分析 以丹參水提液對蘿卜種子、種苗的化感效應值為研究對象，進行主成分分析。
結果顯示，第1主成分的貢獻率是83.88%，包含了丹參83.88%的化感效應指數信息。將各個主成分的得分乘以其對應的貢獻率，加權求和，可得丹參水浸液對蘿卜種子化感主成分的綜合得分：0.02，0.04，0.06，0.08，0.10 g·mL-1，不同處理濃度組對蘿卜種子的化感效應值依次為12.404，3.391，0.049，-1.747，-13.266。
2.2 HPLC圖譜研究
2.2.1 色譜條件 流動相 乙腈（A）-0.026%磷酸（B）；梯度洗脫程序：0～15 min，17%～23%A；15～30 min，23%～25%A；30～40 min，25%～90%A；40～50 min，90%A。檢測波長 286 nm，流速1 mL·min-1，柱溫 25 ℃。
2.2.2 對照品溶液製備 各精密稱取迷迭香酸和丹酚酸B對照品適量，加甲醇製成質量濃度為15，160 mg·L-1的溶液。
2.2.3 供試品溶液製備 取丹參粉末約50.0 g，精密稱定，加水室溫浸提48 h，濾液經離心，高溫滅菌後分別稀釋為質量濃度0.02，0.04，0.06，0.08，0.10 g·mL-1（生藥濃度）的係列處理液，0.45 μm微孔濾膜過濾，備用。
2.2.4 方法學考察 精密度試驗：取同一供試品液，連續進樣5次，計算色譜峰相對保留時間和峰麵積的RSD均小於3%。重複性試驗：取5份樣品，製備供試品溶液，測定，結果顯示色譜峰的相對保留時間和峰麵積的比值 RSD
2.2.5 指紋圖譜建立 將供試液按色譜條件進樣，通過液相工作站和中藥色譜指紋圖譜相似度評價係統軟件（2004A 版）處理。
2.3 譜效相關分析
以丹參水浸液對蘿卜種子、種苗主成分化感效應值為母序列，以其指紋圖譜特征峰相對峰麵積為子序列，建立灰關聯度分析。
根據關聯序確定各特征峰對化感效應作用的貢獻大小，各峰順序依次為9，6，18，2，14，5，1，16，12，10，11，7，17，8，15，13，3，4。其中有15個峰的關聯度大於0.8，提示丹參水浸液的化感效應作用是其“有效成分群”共同作用的結果。
3 討論
本研究對丹參水提液濃度進行了前期優選，考察了蒸餾水，0.001，0.01，0.10 g·mL-1 3個質量濃度丹參水提液對丹參種子，蘿卜種子的化感效應，結果僅0.10 g·mL-1處理組與其他處理組有顯著性差異。鑒於方便丹參水提液抽濾，故設立0.02～0.10 g·mL-1的質量濃度。為全麵評價丹參水浸液對蘿卜種子、種苗的化感效應，本文采用了發芽率、發芽勢、發芽指數、苗根長、苗地上部分長、株高、苗鮮重、苗幹重8個指標。由於指標較多且指標相互之間存在明顯相關性，采用了主成分分析對8個指標進行簡化，並結合線性函數量化了評價指標，有利於化感效應的綜合評價。灰關聯度分析具有既包含已知信息，又包含未知信息的特點，可利用已知信息揭示未知的信息[5]，適用於具有複雜化學成分的中藥材質量評價。基於此，本研究致力於丹參化感效應的存在與否及化感物質確定，通過灰關聯度模式建立了丹參水浸液HPLC指紋圖譜與對蘿卜種子、種苗化感效應的“譜效”關係，為化感作用研究提供了新思路。丹參水浸液HPLC指紋圖譜中的每一個特征峰代表一種化學成分，在18個共有峰中有15個峰與化感效應的關聯度大於0.8，說明這15個成分（包括丹酚酸B、迷迭香酸）均對化感效應有貢獻，提示丹參水提液對蘿卜種子、種苗的化感效應是其內部多種成分共同作用的結果，HPLC圖譜中與化感效應密切相關的未知共有峰所代表的成分有待於進一步探明。
[參考文獻]
[1] 郭冠瑛，王豐青，範華敏，等.地黃化感自毒作用與連作障礙機製的研究進展[J].中國現代中藥，2012，14（6）：36.
[2] 中國藥典.一部[S].2005：5.
[3] 周潔，王曉，王建華，等.白花丹參和紫花丹參對菘藍化感效應比較研究[J].中藥材，2013，36（9）：1389.
[4] 周潔，王曉，王建華，等.丹參和白花丹參對黃芩化感效應的比較研究[J].山東科學，2012，25（5）：30.
[5] 李峰，張振秋，康廷國.灰關聯度法評價鹿鞭藥材質量的研究[J].中藥材，2008，31（2）：189.
[責任編輯 呂冬梅]