3.4 對Caco-2細胞P-gp蛋白表達的影響 用Western blot分析P-gp蛋白表達，與對照組相比，P-gp抑製劑維拉帕米顯著降低P-gp蛋白表達，利福平顯著誘導了P-gp蛋白表達，四物湯水煎液對P-gp蛋白有顯著誘導效應，綜合之前的羅丹明123外排和MDR1基因表達結果，表明四物湯水煎液能夠通過誘導MDR1基因的表達來增加P-gp蛋白表達，進而增強P-gp的功能。
4 討論
本實驗室前期從全方、有效部分、有效成分3個化學層次和整體、器官、細胞及分子4個藥理水平，基本闡明了補血名方四物湯的藥效物質基礎，並重構了基於有效成分的新組方，首次發現了果糖和芍藥苷的補血活性[12-14]，本文深入到藥物代謝動力學領域，初步探討四物湯可能對機體產生的效應。選擇公認的P-gp的陽性抑製劑維拉帕米組，同時設置P-gp的陽性誘導劑利福平組[15]，並通過Q-PCR篩選可靠穩定的時間點，考查了四物湯水煎液對P-gp的功能和表達影響。
結果表明，經過48 h的長時幹預，四物湯水煎液高、中、低濃度能提高了Caco-2細胞膜上P-gp基因表達的水平，增強了Caco-2細胞P-gp的外排功能，而在四物湯水煎液幹預1 h，對P-gp的功能影響不是很明顯，提示四物湯水煎液在一定的濃度範圍，其長期幹預能上調Caco-2細胞膜上P-gp的表達水平，四物湯水煎液的作用在該濃度範圍呈濃度依賴性的傾向，並提示了四物湯短時間內，對P-gp的功能影響不大，在臨床上可以考慮合理的搭配聯合用藥。
四物湯的化學成分分析表明，四物湯的物質基礎豐富，糖類、阿魏酸、川芎嗪和芍藥苷為其治療血虛證的主要活性成分[16]，同時也有文獻報道，川芎嗪不僅被P-gp外排，同時對P-gp具有抑製作用[8]，另外高利臣[10]研究表明，阿魏酸對P-gp具有誘導作用，而從四物湯化學成分含量表明阿魏酸的含量要比川芎嗪的要高很多，故猜測可能是四物湯水煎液中的阿魏酸對P-gp起主要作用，這個信息為下步實驗提供一定方向性。
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[責任編輯 張寧寧]