六味地黃軟膠囊HPLC指紋圖譜研究
製劑與炮製
作者：石偉 李家春 楊素德 李雲 靳瑞婷 孫仙玲 王振中 畢宇安 蕭偉
[摘要]建立六味地黃軟膠囊的HPLC指紋圖譜，為六味地黃軟膠囊質量控製提供參考。采用HPLC，AgilentC18（4.6mm×250mm，5μm）色譜柱，以乙腈-0.02%三氟乙酸為流動相，梯度洗脫，流速1.0mL·min-1，柱溫30℃；檢測波長0～60min，238nm；60～70min，210nm，對不同批次六味地黃軟膠囊的指紋圖譜進行測定，采用中藥指紋圖譜相似度評價係統（2004A版）軟件分析，以馬錢苷為參照峰，從中選擇了16個分離較好的共有峰，並根據共有峰對12批樣品進行聚類分析（HCA）和相似度分析（SA）。聚類分析將12批樣品劃分為2類，其中7號為第一類，其他均為第二類；相似度結果表明，12批六味地黃軟膠囊指紋圖譜與共有模式之間相似性良好，相似度均大於0.92，SA分析結果與HCA分析結果基本一致。該方法簡便易行，有較好的精密度、重複性及穩定性，可以作為六味地黃軟膠囊質量的評價方法。
[關鍵詞]六味地黃軟膠囊；高效液相色譜法；係統聚類分析；指紋圖譜
[收稿日期]2014-09-09
[通信作者]*蕭偉，博士生導師，Tel：（0518）81152337，E-mail：
[作者簡介]石偉，碩士研究生，Tel：18888130365，E-mail：
六味地黃方出自宋代《小兒藥證直覺》，係由熟地黃、山茱萸、牡丹皮、山藥、澤瀉、茯苓6味藥材按8∶4∶3∶4∶3∶3配伍而成。本方組方嚴謹，三補三瀉，滋補而不留邪，降泄而不傷正，是中醫十大名方之一[1]。
目前，市售六味地黃製劑的劑型包括丸劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液等，其中軟膠囊是繼傳統劑型之後發展的一種較新劑型，具有掩蓋藥物的不良氣味、延緩藥品氧化或者吸潮、提高生物利用度等優點[2]。近年來，六味地黃製劑質量控製方法研究主要體現在多成分含量測定[3-5]、指紋圖譜[6]、溶出度[7]等方麵。《中國藥典》2010年版規定六味地黃軟膠囊的含量測定指標為酒萸肉中的馬錢苷、牡丹皮中的丹皮酚[8]，對成分複雜的六味地黃軟膠囊，不能全麵反映其質量。
本研究采用HPLC對12批六味地黃軟膠囊樣品進行了較為全麵的指紋圖譜研究，對其中7個共有峰進行了指認。並采用聚類分析和相似度評價對實驗結果進行了統計，兩者結果均表明，該產品各批次之間差異較小。本方法操作簡便，重複性高、穩定性較好，可以為六味地黃軟膠囊質量標準提升提供參考。
1材料
島津高效液相色譜儀（日本島津公司）；XP6電子天平（METTLERTOLEDO）；BP211D型電子分析天平（METTLERTOLEDO）。
沒食子酸（批號110831-200803，純度90.1%）；5-羥甲基糠醛（批號110626-201308）；馬錢苷對照品（批號110640-201005，純度99.2%）；芍藥苷（批號110736-201136，純度94.9%）；丹皮酚（批號110708-200506）；熊果酸（批號110742-201220，純度99.3%）均來源於中國食品藥品檢定研究院；莫諾苷（由軍事醫學科學院從山茱萸藥材中分離得到，經1H-，13C-NMR進行結構鑒定，HPLC峰麵積歸一化法分析測得純度為95.7%）。乙腈（色譜純）；水為純化水，其餘均為分析純。